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《第八届海峡两岸心血管科学研讨会论文集》2011年
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TRPV4-SKCa3离子通道复合体在小动脉血流和血压调节中的作用

马鑫  杜鹃  黄聿  姚晓强  
【摘要】:内皮源性超极化因子(EDHF)介导的信号通路在小动脉血流和血压稳态调节中发挥关键作用,但其产生的分子机制尚未明确。本研究旨在探讨EDHF信号通路产生的分子机制。在原代培养的小动脉内皮细胞上,通过免疫共沉淀、膜电位和细胞内Ca~(2+)浓度同步测量、全细胞和穿孔膜片钳、细胞RNA干扰等实验发现,瞬时感受器电位通道V型成员4(TRPV4)和小电导钙激活钾通道(SKCa3)通过物理上的连接形成TRPV4-SKCa3离子通道复合体,其中TRPV4介导内皮细胞局部Ca~(2+)升高,激活其邻近的SKCa3并引起膜电位超极化。在小动脉血管段上,通过玻璃微电极细胞内记录、610M多通道血管张力测定仪、血管段RNA干扰等测量发现,该离子通道复合体是乙酰胆碱(ACh)诱导动脉内皮细胞膜电位变化和舒张的主要通路。在活体大鼠肠系膜血管床上,MoorFLPI激光多普勒血流测量、颈动脉插管法血压测量实验发现,该离子通道复合体是ACh诱导肠系膜三级动脉血流增加的主要通路。实验进一步发现,在糖尿病和高血压的大鼠小动脉内皮细胞上,TRPV4和SKCa3形成的物理连接显著减弱,同时,TRPV4和SKCa3在功能上耦联也显著减弱,提示疾病状态下TRPV4-SKCa3离子通道复合体的物理连接减弱是导致小动脉血流和血压调节紊乱的主要原因之一。本研究使用多种手段发现并证明了TRPV4-SKCa3离子通道复合体参与形成EDHF信号通路,及其在小动脉血流和血压稳态调节中的作用。

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