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《中国奶牛协会2007年会论文集(上册)》2007年
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牛结核病抗体胶体金快速检测技术的建立和初步运用

张书环  杨俊兴  晁彦杰  颜邦芬  吴波  曹莎  陈颖钰  谭亚娣  陈焕春  郭爱珍  
【摘要】:目的:建立一种快速检测牛结核抗体的新方法,用以诊断牛结核病。方法:利用胶体金免疫层析技术原理,用大肠杆菌表达的牛分枝杆菌重组抗原 MPB83和 MPB70分别作为胶体金标记抗原和检测线上的捕获抗原,制备牛结核抗体检测试纸条。结果:粒径为40nm 的胶体金制备的试纸条敏感性最高;胶体金最佳标记 pH 值为6.0; MPB83抗原最适标记量为每毫升胶体金6.5μg;MPB70抗原的最适包被浓度为3.0mg/mL;抗 MPB83蛋白 IgG 的最佳包被浓度为2.5mg/mL;交叉试验证明试纸条不与牛的其他非相关疾病的阳性血清反应,具有较高的特异性。比较实验证明其敏感性显著高于韩国进口试纸条。在上述试验条件下生产了一批胶体金试纸条进行临床样品检测,并与细菌分离培养、结核菌素皮内变态反应(TST)和韩国试纸条比较。本试纸条与牛分枝杆菌分离培养的符合率为 85%,与 TST 的符合率为79.73%,与韩国试纸条的符合率为98.75%。结论:快速检测牛结核抗体的胶体金免疫层析试纸条具有敏感、特异、简便、快速的特点,适用于对牛结核病进行普查和检疫,也可作为 TST 的辅助诊断方法,在牛结核根除计划中具有良好的应用前景。

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