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SiRNA特异性沉默高血压相关基因FXYD5及其功能研究

杨德业  施翔翔  来丹丹  高瞻  张敏  黄晓燕  张怀勤  
【摘要】:目的通过RNA干扰(RNAi)技术特异性沉默大鼠高血压相关基因FXYD5的表达,探索该基因在高血压发病机制中的作用。方法化学合成针对大鼠FXYD5基因的4个特异性siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3、siRNA-4),以含非特异性编码序列的siRNA-con为对照,转染大鼠胸主动脉平滑肌细胞(CRL-1444),通过半定量RT-PCR筛选和real-time PCR定量检测FXYD5的mRNA表达水平,并研究FXYD5基因的特异性沉默对平滑肌细胞增殖效应、迁移力以及细胞膜Na~+-K~+-ATPase活性的影响。结果siRNA-1和siRNA-2分别使FXYD5的mRNA表达下降93.34%和94.64%,差异有统计学意义;对照组siRNA-con与空白对照组(Blank)FXYD5的mRNA表达差异无统计学意义。各转染组间细胞增殖效应差异无统计学意义,siRNA-1和siRNA-2转染组平滑肌细胞迁移力低于siRNA-con转染组和空白对照组,差异有统计学意义,siRNA -1和siRNA-2转染组平滑肌细胞Na~+-K~+-ATPase活性低于siRNA-con转染组和空白对照组,差异有统计学意义。结论RNA干扰技术能选择性沉默大鼠胸主动脉平滑肌细胞的FXYD5基因的表达水平,并抑制平滑肌细胞的迁移力和细胞膜的Na~+-K~+-ATPase活性,初步揭示了FXYD5基因的潜在功能以及在高血压发病机制中可能扮演的角色。FXYD5基因可能是高血压病新的致病相关基因。

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