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《现代分子植物育种与粮食安全研讨会论文集》2011年
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sbk和sck双价抗虫转基因水稻的育成和鉴定

李聪  张启军  刘少奎  赖东  漆庆明  吕川根  
【摘要】:通过转基因操作导入抗虫基因是提高现代优良水稻品种抗虫能力的一种非常有效的育种方式。结合传统育种的农艺性状选择与现代分子育种技术可以提高育种效率。本研究将2个抗虫基因转入超级稻主推品种南粳45中,并对转基因植株进行了一系列分子检测,旨在鉴定并筛选出优良抗性单株,为该品种在未来水稻生产中更好地得到应用奠定抗性基础。将包含2个抗虫基因【sbk(修饰后的Cry1A(c))和sck(修饰后的CpTI)】的质粒载体pCDMARUBA-Hyg转入农杆菌EHA105中,感染南粳45的愈伤组织,得到再生植株。用sbk和sck基因的引物进行PCR分析,从97个再生植株中筛选出42含有2个抗虫基因而没有潮霉素基因的阳性植株。通过Southern杂交发现,42个阳性植株中具有1-5个拷贝外源基因的分别有23,11,5,2和1个单株。用RT-PCR检测发现,4个单拷贝株衍生的28个T3代植株外源基因能正常表达。人工饲喂二化螟幼虫试验也表明,转基因植株的幼虫死亡率达94%-100%,抗虫能力比对照明显提高。筛选出T54-2,T45-11和T45-14这3个农艺性状优良的株系。

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