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《江苏省遗传学会第八届会员代表大会暨学术研讨会论文集》2010年
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大豆花叶病毒的组织印迹与RT-PCR检测

战勇  喻德跃  
【摘要】:用改进的组织印迹方法批量检测黄淮地区69份SMV样品,结果发现42个标样呈现非常清晰的蓝紫色阳性反应,26个标样显色较弱而无法确证,1个标样呈阴性反应。进一步对600dpi扫描并放大200倍的图片进行分析,发现26个显色弱的标样中有25个呈阳性反应,1个标样显色很弱仍无法确证,使得检出率提高了37%。利用RT-PCR程序对随机选取的8个样品进行验证,发现纯化与未纯化的RNA模板均能得到较为清晰的扩增条带,而只有纯化后的PCR产物二次扩增才有预期的条带,且双酶切可产生245 bp、255 bp和307 bp三个预期的片段。表明改进的组织印迹方法能够用于批量、高效地检测SMV,而RT-PCR可用于更为精确的检验。

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