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《苏州市自然科学优秀学术论文汇编(2008-2009)》2010年
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B7-H3分子上调性表达在CD40活化的树突状细胞介导抗肿瘤免疫应答中的作用

陈成  朱一蓓  
【摘要】:目的:探讨CD40信号上调树突状细胞B7-H3分子表达在其介导的抗肿瘤免疫应答中的作用。方法:采用GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导小鼠髓系DCs,并利用mCD40L-CHO和TNF-α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载的DCs制备成熟DCs瘤苗;利用共聚焦显微镜观察未成熟DCs对凋亡肿瘤细胞的吞噬;采用间接免疫荧光标记法检测成熟DCs上B7-H3分子的表达;RT-PCR检测B7-H3 mRNA转录水平;混合淋巴细胞反应(MLR)和B7-H3单抗阻断实验分析CD40配基化的DCs表面B7-H3分子在T细胞活化中的作用;3H-TdR掺入试验检测DCs对T淋巴细胞的促增殖效应;ELISA测定各组MLR反应上清中IFN-γ的分泌水平。建立B细胞淋巴瘤小鼠模型,采用DCs瘤苗激发肿瘤特异性T细胞过继回输荷瘤小鼠,观察荷瘤小鼠肿瘤生长速度和大小,B7-H3单抗阻断实验分析CD40配基化的DCs表面B7-H3分子对肿瘤特异性T细胞激发作用;胞内染色分析各治疗组小鼠肿瘤组织中CD3+IFN-γ+细胞的浸润。结果:未成熟DCs能有效吞噬凋亡肿瘤细胞;B7-H3分子在DCs不同分化发育阶段呈现不同程度表达,CD40配基化能显著上调凋亡肿瘤细胞负载的DCs中B7-H3表达,TNF-α激发的DCs弱表达B7-H3(P0.05);阻断CD40配基化的DCs上B7-H3分子能抑制T细胞增殖和IFN-γ的分泌。凋亡肿瘤细胞负载的DCs并经CD40信号刺激成熟后激发的肿瘤特异性T细胞体内抗肿瘤效应最为显著(P0.05),该治疗组小鼠肿瘤组织中浸润的CD3+IFN-γ+细胞比例最高,封闭B7-H3分子后,CD40信号刺激成熟的凋亡肿瘤细胞负载的DCs激发的肿瘤特异性T细胞体内抗肿瘤作用削弱(P0.05)。结论:CD40配基化的肿瘤特异性树突状细胞较TNF-α激发的DCs更具抗肿瘤免疫应答能力,B7-H3分子上调性表达有助于CD40配基化的DCs介导T细胞抗肿瘤应答。
【作者单位】:苏州大学附属第一医院
【分类号】:R730.3

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