结核分枝杆菌环介导恒温扩增(LAMP)快速检测方法的构建

【摘要】：目的 DNA环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术,本文对国内建立的结核分枝杆菌LAMP快速检测方法进行了介绍和评价。方法实验菌株来源于北京结核病胸部肿瘤研究所。本文以结核分枝杆菌作为研究对象,设计了4条LAMP引物特异地识别结核分枝杆菌中gyrB基因的六个特殊区域。所有的菌株样本提取DNA作为模板,加入LAMP反应管后,65℃恒温反应60分钟即可。其结果可以通过肉眼观察到的颜色变化来判断。结果本实验共验证了79株临床和标准菌株。对于这些菌株的培养物,LAMP实验的灵敏度为100%,特异度为92%。结论结核分枝杆菌LAMP快速检测方法是一种快速、可靠的结核分枝杆菌诊断方法。在基层实验室中,有很好的推广价值。