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板蓝根阿拉伯半乳聚糖的理化性质及疫苗佐剂活性研究

王玉霞  朱婷  李倩  麻浩  李海霞  巫亚俊  单俊杰  
【摘要】:目的:板蓝根(Isatis indigotica)是我国重要的传统中药材之一,其水煎液具有显著的抗病毒功效。前期研究发现板蓝根总多糖(ⅡP)能显著提高OVA抗原免疫小鼠的特异性抗体滴度。总多糖采用DEAE-纤维素柱层析分离得到活性组分ⅡP-B,ⅡP-B对H1N1流感疫苗免疫小鼠具有显著的佐剂活性。本文将对ⅡP-B进行分离纯化获得活性成分,同时研究其理化性质,评价对乙肝疫苗的佐剂效果。方法:采用Sephadex G-100凝胶层析填料分离和纯化ⅡP-B,采用HGPC、CE、IR、NMR、GLC-MS及高碘酸钠氧化-Smith降解反应、甲基化反应等方法研究理化性质。采用肌肉注射方式免疫小鼠,评价IIP-2(200μg/鼠)对乙肝疫苗抗原(2μg/鼠)的佐剂效果。采用ELISA方法测定抗体滴度,采用MTT方法测定细胞增殖活性,采用试剂盒测定细胞因子含量。结果:从有效组分ⅡP-B中分离获得一个分子量均一的多糖IIP-2,其峰高分子量为66400 Da,由阿拉伯和半乳糖组成,单糖摩尔比为Ara:Gal=1.0:1.5。结构解析表明IIP-2的主要骨架为β-(1→3,6)-半乳聚糖,同时还含有→1)-Gal,(1→6)-Gal,(1→5)-Ara和→1)-Ara等分支连接方式。IIP-2与乙肝抗原联用免疫小鼠2次,能显著提高血清特异性IgG、IgM、IgG1、IgG2a和IgG2b滴度,佐剂效果优于铝佐剂(200μg/鼠)。同时ⅡP-2还能提高受免小鼠细胞免疫能力,促进脾细胞增殖和IFN-γ的分泌,调节T细胞向Th1方向分化。结论:板蓝根阿拉伯半乳聚糖是一种分子量均一多糖,理化性质相对明确和稳定,具有显著疫苗佐剂活性,有可能进行深入的研究和开发。

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1 张维;;分枝杆菌成份与免疫活性的关系[J];国外医学(微生物学分册);1979年03期
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