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三氧化二砷联合羟基喜树碱抗人肝癌细胞的实验研究

周艳  于志坚  
【摘要】:目的:探讨三氧化二砷(As_2O_3)联合羟基喜树碱(HCPT)在体外对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响,观察两药合用的效果,为临床用药提供理论依据。方法根据公式:临床药物血浆峰值浓度(PPC)(μg/ml)=[临床用药量(mg/m~2)×平均体表面积/平均体重]×100 /60,选用一定浓度梯度As_2O_3(0.25、0.5、1.0、2.0、4.0μg/ml)和HCPT(0.5、1.0、2.0、4.0μg/ml)分别及联合(按两因素析因设计分为20组)与人肝癌细胞株SMMC-7721孵育后,采用MTT法测定细胞生长抑制率、荧光显微镜观察细胞凋亡形态、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,并运用中效原理进行联合用药分析。结果不同浓度下As_2O_3与HCPT合用对肝癌细胞的生长抑制率明显高于相应的单药应用(P0.01),合用后的中效浓度(即达到0.5效应时的药物浓度)分别为0.5μg/mlAs_2O_3与0.5μg/ml HCPT,低于分别单用时的中效浓度,两药合用在抑制率0.35时,两药相互作用系数CI1(CI1,证明两药作用性质为协同;如CI=1,则两药作用性质为相加;如CI1,则两药作用性质为拮抗);Hoeehest33342染色后,荧光显微镜下可见细胞核染色质高度凝聚、边缘化,核裂解成碎块,产生凋亡小体;经半定量计数分析表明:As_2O_3与HCPT联用后对细胞的凋亡诱导作用较单用时明显增强(P0.01);在流式细胞仪上可见"凋亡峰",AB_2O_3干预48h后,细胞周期被阻滞于G2/M期,HCPT干预48h后,细胞周期被阻滞于S期,联合干预48h后,G0/G1期及S期细胞比例增加。结论As_2O_3与HCPT联合应用在体外能显著增加两药单用时对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用,0.5μg/ml As_2O_3与0.5μg/ml HCPT联合时具有较好的抗肝癌协同作用,可以达到减毒增效的目的,这对于指导临床用药具有重要意义。

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