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《中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第六次学术交流会论文集》2004年
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大麦黄矮病毒GPV株系的序列分析及其抗病毒转基因小麦的获得(英文)

成卓敏  何小源  吴茂森  陈彩层  许雷  周广和  
【摘要】:GPV是大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus,BYDV)中国分离物,与国外的MAV、PAV、SGV、RPV、RMV的抗血清不发生免疫反应.本研究对GPV的序列进行分析鉴定并推测了其氨基酸序列.编码RdRP的ORF1长度为1953nt,编码一个71.4kD的蛋白:ORF2长度为1872nt,编码一个70.1kD的蛋白.GPV的外壳蛋白,分子量为22.2kD,由长度为603nt的ORF3编码.与MAV、PAV和RPV一样,在GPV外壳蛋白编码区内存在一个次级阅读框ORF4,编码的17kD蛋白可能与VPg有关.ORF4的长度为453nt.ORF5长度为1326nt,紧接在外壳蛋白之后,编码一个72.2kD的蛋白,与蚜虫传毒专化性有关.GPV的核苷酸及氨基酸序列与RPV的同源性要高于PAV和MAV.根据BYDV GPV 的序列,我们应用RT-PCR获得了外壳蛋白基因和复制酶基因的cDNA.将cDNA插入到不同的质粒构建了其表达载体.通过花粉管通道法,建立了一个可快速、高效地获得抗BYDV的转基因小麦的技术体系.

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