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《山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编》2001年
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抗HLA-B27单克隆抗体的研制及初步应用(摘要)

吴福国  韩晓琳  司传平  刘玉庆  
【摘要】:强直性脊柱炎是一种严重危害人类健康的风湿性疾病,该病与HLA-B27抗原强相关。因此,检测HLA-B27抗原成为临床诊断强直性脊柱炎的最重要的辅助手段之一。鉴于国内目前仍使用特异性不高的抗血清检测该抗原,而未见用抗HLA-B27单克隆抗体作为临床检测HLA-B27的报道,本课题组对此进行了研究。首先利用亲和层析法从HLA-B27阳性强直性脊柱炎病人外周血淋巴细胞中分离制备了HLA-B27抗原,然后用此抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,制备了特异的抗HLA-B27单克隆抗体,琼脂双扩散法检测Ig类别为IgG_(2b)型。用间接免疫荧光法检测该抗体的特异性显示,该抗体只与HLA-B27阳性细胞结合,而与B27阴性B7阳性或B27阴性B22阳性细胞不结合。表明该单抗有较高的特异性。为寻找简便、快速的临床检测HLA-B27抗原的新方法,本课题组采用Goding法将该抗体用FITC(异硫氰酸荧光素)标记,制备了荧光素标记的抗HLA-B27单克隆抗体。经初步检测表明,用常用的微量淋巴细胞毒试验(抗血清)检测的12例强直性脊柱炎HLA-B27阳性患者,用该单抗检测HLA-B27均阳性,而用微量淋巴细胞毒试验检测的15例HLA-B27阴性腰腿痛患者,用该单抗亦未检测出HLA-B27阳性患者。表明该单抗有较高的可靠性,但在临床应用方面尚需做更多的工作。

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