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尖孢镰刀菌古巴专化型4号小种T-DNA插入突变体Focr4-1562及其基因敲除子的生物学表型研究

吴飞宏  曾涛  曾会才  
【摘要】:通过根部接菌试验测定获得Focr4致病力严重减弱的单拷贝插入突变体Focr4-1562,然后应用同源重组的方法进行基因敲除,获得含有潮霉素抗性和sGFP标记的敲除子△Focr4-1562。研究了Focr4-1562,△Focr4-1562与Focr4之间的部分致病性相关的表型差异。结果表明,野生型、插入突变体及其敲除子的最适生长温度均在28℃,最适的生长pH值为7.0~8.0之间。插入突变体及其敲除子的孢子形态与野生型相比并没有显著的变化,但敲除子△Focr4-1562的产孢时间明显推迟,并且产孢量相对于野生型来说明显降低;插入突变体及其敲除子对细胞壁降解酶的抗性大大增强。通过插入突变体、敲除子及野生型的玻璃纸穿透试验、活体叶片及根部接种致病性试验的测定可以进一步肯定笔者所做插入突变体Focr4-1562的致病性严重减弱。这一研究将是解析突变体Focr4-1562突变基因功能的直接证据。

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