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《基因开启未来:新时代的遗传学与科技进步——湖北省遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编》2009年
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两个新的棉花基因在NaCl胁迫下的表达调控分析

李刚  邰付菊  骆娟  郑勇  李学宝  
【摘要】:为研究棉花等植物的抗逆应答机制,我们从30多个可能与棉花抗逆性相关的候选基因中筛选获得了两个新基因,分别命名为19-1,19-2。生物信息学分析表明,这两个基因的编码蛋白均含有两个保守的C2/H2锌指蛋白结构域和一个核定位信号区(NLS),并含有保守的Ser/Thr磷酸化位点。Real-time RT-PCR显示19-1在棉花下胚轴中优势表达,19-2在棉花纤维中优势表达。逆境胁迫实验表明,这两个基因在逆境胁迫下的表达模式存在相似性,均受高盐和干旱诱导表达,而对低温和ABA胁迫不敏感。利用Genome walker PCR方法,克隆了这两个基因的启动子,构建了启动子-GUS融合载体并转化拟南芥,GUS活性分析表明这两个启动子都是诱导型启动子,受高盐诱导表达。构建了19-1/-2:GFP融合载体并转化拟南芥,研究该蛋白的亚细胞定位。在共聚焦显微镜下,GFP荧光主要位于细胞核内,表明这两个蛋白都是核蛋白。进一步利用酵母双杂交体系证实这两个蛋白都具有转录自激活特性,但N端缺失两个保守C2/H2锌指结构域后,该蛋白便丧失了转录自激活特性。上述结果表明,这两个蛋白可能是受激酶磷酸化的转录因子,而其N端的两个保守C2/H2结构域具有转录激活特性。

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