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降解有机磷化合物的大肠杆菌表面展示工程菌的构建与酶活分析

张红星  李茜茜  叶婷  郑世学  李林  
【摘要】:利用丁香假单胞菌冰核蛋白(InaK)的 N-末端作为锚定单元和有机磷水解酶(OPH)作为功能蛋白,构建了一株在细胞表面展示有机磷水解酶的大肠杆菌工程菌 E.coli JM109-405。对该工程菌的全细胞酶活性进行了正交实验分析,结果表明在20℃和添加 Co~(2+)浓度为100 μmol/L 的培养条件下,以0.1mmol/L IPTG 诱导8h 时全细胞酶活达到0.6168 U/mg 细胞干重的最高值,是目前国外同类工作所报道的全细胞 OPH 酶活性的13.7倍以上。质粒稳定性分析发现工程菌在 LB 固体培养基上经连续转接传代168 h,质粒稳定性仍达到60%。

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