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《湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第八届第十七次学术年会论文汇编》2007年
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Klebsiella sp.601细菌漆酶基因的克隆表达、蛋白纯化与酶学性质研究

尹姣  瞿国胜  李洋  王行国  
【摘要】:漆酶(EC 1.10.3.2)是自然界广泛分布的多铜氧化酶家族中的一个成员,它能氧化一大类酚及非酚类化合物。漆酶广泛存在与植物和真菌中,目前在细菌中也有发现。同植物及真菌漆酶比较,细菌漆酶可能比真菌漆酶有更多的优点,如不需糖基化、热力学稳定性好,酶活最适 pH 广泛等。本实验室已从土壤中筛选到的一株产漆酶菌 Klebsiella sp.601, 但产酶量较低,以致于不能直接从细菌细胞内分离纯化细菌漆酶,更无法全面了解该细菌漆菌的酶学牲质。为克服这一困难,本研究试图从 Klebsiella sp.601基因组中克隆出编码细菌漆酶的基因,在大肠杆菌表达系统中大量表达,分离纯化获得纯酶并进行初步的酶学分析, 为后续开发利用细菌漆酶,或运用蛋白质工程的方法对该酶进行改良提高它的酶活力或稳定性创建一个良好的平台。

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