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《湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会论文摘要汇编》2004年
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HPV16mE7与结核杆菌HSP70嵌合DNA疫苗的免疫效果观察

王同祥  李辉  
【摘要】:目的:突变HPV16(人乳头瘤病毒16型)E7基因碳末端的锌指结构,并嵌合结核杆菌HSP70(热休克蛋白70)基因,研究并比较HPV16E7-HSP70嵌合DNA疫苗与其他几组非嵌合型DNA疫苗的免疫原性。方法:PCR定点突变法将E7基因第91位半胱氨酸密码子突变为甘氨酸密码子,利用DNA重组技术分别构建pcd-HPV16mE7-HSP70、pcd-HSP70、pcd-HPV16mE7、pcd-HPV16wE7重组质粒。雌性C57BL/6小鼠36只,随机分为6组,每组6只:A:pcd-HPV16mE7-HSP70组;B:pcd-HSP70组:C:pcd-HPV16mE7组:D:pcd-HPV16E7组:E:pcdDNA3.1空载体组F:生理盐水对照组。分别于胫前肌注射0.25%利多卡因50ìL,3天后同一部位多点注射重组质粒100ìg/只/次,间隔2周免疫1次,共3次。末次免疫后4周处死小鼠分离脾淋巴细胞,经E7蛋白体外刺激48h后分别做特异性脾淋巴细胞增殖试验(MTT法)以及测定脾细胞上清夜中的IFN-γ和IL-4的水平(ELISA法)。结果:MTT法比色显示A、B、C、D各实验组组与空载体和生理盐水对照组都存在淋巴细胞增殖反应(P0.01=,A组与其他各组比较(P0.05=。ELISA检测结果显示A、C、D组IFN-γ的分泌量最高,与其他组比较有显著性差异(P0.05=。IL-4分泌实验组与对照组无显著性差别。结论:HPV16E7-HSP70嵌合DNA疫苗与其他疫苗相比更能诱导小鼠产生特异性细胞免疫应答。
【分类号】:R392.1

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