收藏本站
《湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集》2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

丙型肝炎病毒E2糖蛋白糖基化位点突变体的研究

万崎  冯勇  章晓联  陈新文  吴建国  
【摘要】:HCV基因组编码两个包膜糖蛋白:E1和E2。近来有研究表明病毒的糖基化位点Asn-X-Thr/Ser糖基化后能和内质网分子伴侣之间相互作用,这种作用对于病毒蛋白的正确折叠,装配以及成熟都起到了很关键的作用。另外,也有研究表明HCV E1第四个糖基化位点突变会增强小鼠的体液免疫应答。为了研究HCV E2糖基化位点的改变是否会影响病毒蛋白的合成装配,以及是否会引起机体免疫应答的改变,特利用定点突变的PCR技术构建三个重要的糖基化位点的突变体,采用高保真性的Pfx DNA polymerase,设计两对引物,分别引入两个突变位点,通过PCR体外定点突变,使E2第529、577位核苷酸由A突变为T,从而使AAC编码的天冬酰氨(-Asn-)突变为TAC编码的酪氨酸(-Tyr-),使得N-糖基化位点-NNT-,-NST-突变为YNT,YST。由此构建两个单位点突变体以及一个双位点突变体,并将突变型E2连接到真核表达载体pCDNA3.1(-)/Myc-HisB上,并通过将不同突变型以及野生型E2对小鼠进行DNA免疫注射,发现了突变型及野生型E2都能引起小鼠CD_4~+T细胞数量的增加,并刺激IFN—γ的分泌,第一个糖基化位点突变体(M1)引起的体液免疫应答较为强烈,表明B细胞识别的抗原表位具有糖特异性。本研究为进一步探讨HCV包膜蛋白E2的功能以及HCV新疫苗的研究奠定了基础,同时,将各型别E2转染至CHO细胞中,并共转染野生型E2以及突变型E2至CHO细胞中,拟通过免疫共沉淀法研究分子伴侣和HCV E2糖蛋白之间的相互作用。

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨洋;陈岚;韩兵社;许彩民;潘华珍;;人朊蛋白不同N-糖基化修饰突变体的构建及其在哺乳动物细胞中表达[J];生物工程学报;2006年03期
2 纪洪涛;刘国振;李莉云;;糖链-细胞表面蛋白质的信号天线[J];中国农学通报;2006年05期
3 王丽影;查锡良;;糖蛋白折叠质量的监控机制[J];生命的化学;2007年04期
4 王家红;童玥;朱玥;田浤;高向东;;蛋白质糖基化的研究进展[J];药物生物技术;2011年01期
5 张倩;杨振;张艳贞;王爱丽;安学丽;晏月明;;蛋白质糖基化修饰的研究方法及其应用[J];生物技术通报;2006年01期
6 陈轶霞;才学鹏;郑亚东;张冬峰;骆学农;乔自林;;绵羊痘病毒甘肃流行株ORF121基因的克隆及序列分析[J];畜牧与兽医;2009年04期
7 陆荫英;陈天艳;成军;梁耀东;王琳;刘妍;张健;邵清;李克;张玲霞;;乙型肝炎病毒X蛋白与去唾液酸糖蛋白受体2突变体相互作用的研究[J];世界华人消化杂志;2003年08期
8 金鹏,田甜,孙智慧,孟安明;用ENU诱导斑马鱼突变的初步研究[J];科学通报;2004年20期
9 常胜合,舒海燕,秦广雍,吴玉萍,赵海珍;拟南芥突变体在磷饥饿反应研究中的应用[J];中国农学通报;2005年08期
10 汪海鹏;张雪莲;曹健;;结核分枝杆菌活性减毒突变体——新型抗结核分枝杆菌候选疫苗[J];中国感染控制杂志;2006年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 万崎;冯勇;章晓联;陈新文;吴建国;;丙型肝炎病毒E2糖蛋白糖基化位点突变体的研究[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年
2 万崎;章晚联;陈新文;;丙型肝炎病毒E2糖蛋白糖基化突变体的研究[A];中国蛋白质组学首届学术大会论文摘要集[C];2003年
3 周红;王国力;黄培堂;黄翠芬;;组织型纤溶酶原激活剂新型突变体的分子设计及其生物活性的初步分析[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(上册)[C];1999年
4 孙璐;文欣;谭英;李贺阳;赵月芳;牛聪伟;席真;;原卟啉原氧化酶及其突变体的酶学性质研究[A];中国化学会第26届学术年会化学生物分会场论文集[C];2008年
5 范树国;林纳生;;水稻台农67突变体与竹花叶病毒之相互作用[A];中国遗传学会功能基因组学研讨会论文集[C];2006年
6 王利祥;李淑峰;贾立军;华子春;;Notch分子EGF结构域突变体的表达与纯化[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
7 夏永恒;周宏专;孙继国;杨兵;;鸡贫血病毒VP3突变体的构建[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
8 陈智忠;张海荣;周晓峰;洪旭晖;王幼群;任小峙;巩志忠;;拟南芥抗旱有关突变体的分离及基因克隆[A];中国遗传学会植物遗传与基因组学专业委员会2005年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
9 尹国维;杜为红;;鼠脑红蛋白突变体氰根络合物溶液NMR结构[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(上册)[C];2006年
10 王棚涛;刘浩;赵好莉;宋纯鹏;;拟南芥干旱有关突变体的筛选及表型分析[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 付毅飞;给基因装上“开关”[N];科技日报;2004年
2 ;我国重要农作物基因组研究进展顺利[N];中国食品质量报;2006年
3 ;科学理解艾滋病病毒的危害[N];人民政协报;2006年
4 白毅;上海药物所SARS病毒研究获系列突破[N];中国医药报;2008年
5 丁香;美揭示埃博拉病毒突起蛋白形状[N];中国医药报;2008年
6 钱海丰 编译;植物耐盐基因的研究[N];中国高新技术产业导报;2002年
7 付毅飞;建造极端微生物“细胞工厂”[N];科技日报;2004年
8 记者  毛黎;美解开胚胎干细胞信号通道之谜[N];科技日报;2007年
9 本报记者 操秀英;“三驾马车”领跑的团队[N];科技日报;2010年
10 记者 李天舒;甲流病毒重要蛋白研究获突破[N];健康报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张树梅;NP突变体抑制流感病毒复制的机制及形成流感病毒病毒样颗粒的关键蛋白[D];内蒙古农业大学;2011年
2 田义新;拟南芥糖感知信号突变体mig3的研究[D];吉林农业大学;2002年
3 刘堰;重组人白介素-2(IL—2)突变体克隆及在巴斯德毕赤酵母系统中的表达与纯化[D];重庆大学;2002年
4 杨在君;小麦三雌蕊突变体幼穗中基因的差异表达分析[D];四川农业大学;2011年
5 王金凤;KGF-2结构与功能的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
6 韩成云;拟南芥短日照依赖型模拟病斑SDL1基因的分离和功能分析[D];湖南农业大学;2012年
7 林建中;拟南芥4CL3基因在类黄酮合成代谢中的功能分析[D];湖南大学;2009年
8 周庆;耐辐射球菌极端辐射抗性相关蛋白的功能与调控研究[D];浙江大学;2007年
9 董志诚;百脉根花模式建成分子机制的初步研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2003年
10 鲁玉清;AtPPR2基因在拟南芥配子体和胚胎发育中的功能分析[D];中国农业科学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈再冉;虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ突变体K27A的化学合成与性质以及两种海南敬钊缨毛蛛毒素的结构与功能研究[D];湖南师范大学;2003年
2 孙嗣梅;蓖麻毒素A链及其突变体的表达、纯化和分析[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
3 宋景娇;盐沼盐杆菌bop基因及启动子的克隆及BR蛋白突变体的构建和光致变色功能的研究[D];武汉大学;2005年
4 齐兴云;盐芥ThTRXh蛋白的亚细胞定位及AtTRXh突变体的表型分析[D];山东师范大学;2006年
5 刘畅;内源水杨酸改变的拟南芥突变体对盐胁迫应答的研究[D];沈阳师范大学;2011年
6 刘丹;葡萄糖氧化酶的体外定向进化[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2007年
7 宋玉伟;拟南芥干旱和过氧化氢突变体远红外成像技术的筛选及其初步定性[D];河南大学;2004年
8 邓小红;金黄色葡萄球菌肠毒素B定点突变体活性的研究[D];西北农林科技大学;2004年
9 段春阳;拟南芥干旱突变体的筛选及其保卫细胞原生质体的分离[D];河南大学;2007年
10 王秋霞;盐芥和拟南芥硫氧还蛋白在氧化胁迫中的功能研究[D];山东师范大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026