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《湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集》2003年
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可溶性HLA-A2-肽复合物的体外折叠与生物素化

翁秀芳  陈浩  吴雄文  梁智辉  韩军艳  黄亚非  龚非力  
【摘要】:目的:可溶性HLA-A2-抗原肽复合物的体外折叠复性与生物素化。方法原核高效表达的HLA H链及β_2m,在抗原肽(EB病毒的膜潜伏蛋白LMP2A的NH_2-CLGGLLTMV-COOH残基)的存在下,通过稀释复性折叠成HLA-A2-抗原肽复合物,并在BirA酶的作用下进行生物素化,使生物素结合到HLA-A2-抗原肽复合物中的H链C端。利用特异单抗(W6/32和兔抗人β_2m抗体)及链霉亲合素进行ELISA和Western blot,检测稀释复性和生物素化的折叠产物。结果折叠复合物中,主要含有HLA H链聚合体、HLA-A2-肽复合物单体及β_2m 3种成分,其中H链聚合体与HLA-A2单体可生物素化。结论成功地获得生物素化的HLA-A2-抗原肽复合物单体,为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础,也为过程复杂的HLA-抗原肽四聚体制备提供了可行的免疫学监控方法。

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