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《贵州省2008年血液学年会论文汇编》2008年
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细胞色素氧化酶P450 2E1基因大鼠骨髓问充质干细胞体外抗肿瘤作用的研究

胡晓彦  王季石  方琴  
【摘要】:目的骨髓间充质干细胞是一种多潜能干细胞,能在体外增殖维持非分化状态,并具有分化成骨、软骨、心肌、血管内皮细胞等中胚层组织的潜能。目前主要应用于组织损伤修复,造血功能重建和一些遗传性疾病,如心肌梗塞、乳腺癌化疗后造血组织重建和骨发生不全。另外由于MSCs进入体内后对伤口和肿瘤有较强的亲和力,作为携带转基因病毒的靶向运载工具有一定的潜力。在人类基因治疗的诸多手段中,重组腺病毒载体因其相对稳定、高滴度、能转染非增殖细胞而备受关注。本课题利用重组腺病毒载体将人体内重要外源性化合代谢的Ⅰ相代谢酶之一的CYP2E1基因转入大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),研究其在体外联合化疗药物杀伤肿瘤细胞的作用机制及其效果。为以后利用骨髓间充质干细胞携带重组病毒进行肿瘤的靶向治疗奠定基础。方法:从雄性大鼠股骨、胫骨骨髓中分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),通过流式细胞仪检测其表型、诱导分化、细胞形态学鉴定BMSCs。用重组腺病毒载体转染BMSCs。采用RT-PCR和Westen Blot法检测CYP2E1的表达情况。转染后用胰酶消化传代培养,MTT法绘制细胞生长曲线。将转基因BMSCs细胞与红白血病细胞株K562在含有环磷酰胺的培养基质中共培养,并设立对照组,MTT法检测转基因BMSCs联合化疗药物及其对照组对肿瘤细胞的杀伤作用,进行统计学分析处理。结果:成功分离、鉴定并转染大鼠骨髓间充质干细胞细胞,在同一化疗药物浓度下,转基因BMSCs共培养组诱导肿瘤细胞凋亡率明显高于对照组。结论重组腺病毒载体能够在BMSCs中介导CYP2E1的表达,且对BMSCs生长无影响,并具有一定的生物活性。在体外具有一定的协同化疗药杀伤肿瘤细胞的作用。
【作者单位】:贵阳医学院附属医院血液科
【分类号】:R73-3

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