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《“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集》2010年
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南美白对虾虾头内源碱性蛋白酶的分离纯化及其酶学特性研究

庄志凯  曹文红  吉宏武  
【摘要】:以南美白对虾虾头为原料,采用层析技术和电泳技术等对虾头内源碱性蛋白酶进行研究,结果表明:将虾头进行组织捣碎,所得到的粗酶液用20%~80%的硫酸铵进行盐析、Q-Sepharose F.F离子交换柱纯化及Sephadex G-150凝胶柱纯化,得到虾头内源碱性蛋白酶纯品,其比活为1386.16 U/mg,得率为32.8%;经SDS-PAGE电泳显示为单一条带,该酶的分子量为79.95 kDa。测得其最适温度为50℃,热稳定较好;最适pH为8.0;该酶的Km值和Vmax值分别为2.54 g/L和7.11 ug/min。金属离子Fe~(3+)、Mn~(2+)、Hg~+对蛋白酶有完全抑制作用。丝氨酸蛋白酶抑制剂能完全抑制该酶活性,胃蛋白酶抑制剂和EDTA对该酶有一定的抑制作用,DTT能激活该酶活性,据此推测该酶为丝氨酸蛋白酶,酶活中心可能还含有少量的金属离子。

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【参考文献】
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