收藏本站
《全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集》2006年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

弓形虫致密颗粒蛋白GRA4基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达

李俊华  吴少庭  翁亚彪  甘燕  刘洪波  刘茂铃  张仁利  高世同  黄达娜  耿艺介  
【摘要】:目的利用分子生物学技术,体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白4(Dense granule protein 4,GRA4)基因,并构建大肠杆菌-分支杆菌穿梭质粒ps3000-GRA4,进行体外表达,研究GRA4基因体外表达产物的抗原性。方法用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因片段,克隆入pGEMT载体,然后亚克隆法构建ps3000-GRA4大肠杆菌-分支杆菌穿梭质粒,此质粒在耻垢分支杆菌(Mycobacteriumsmegmatis mc~2 155)中诱导表达,表达产物进行Western-blotting分析。结果成功扩增了弓形虫的GRA4基因片段;成功构建穿梭质粒ps3000-GRA4,此穿梭质粒的耻垢分支杆菌的诱导表达产物,免疫印迹分析,出现一条约35千道尔顿(Kilodalton,kD)被兔抗弓形虫免疫血清所识别的微弱的蛋白条带。结论耻垢分支杆菌表达的重组蛋白GRA4具有抗原性,为下一步弓形虫重组BCG(bacilli Calmette-Guerin)疫苗的研究奠定了基础。

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 林绮萍,吴少庭,翁亚彪,张仁利,高世同,黄达娜,袁仕善,雷明军,潘晖榕;弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA4基因的克隆与表达[J];中国人兽共患病杂志;2004年06期
2 林绮萍;吴少庭;翁亚彪;雷明军;潘晖榕;袁仕善;温见翔;秦莉;黄达娜;张仁利;高世同;;弓形虫致密颗粒蛋白4的原核细胞表达与纯化[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2005年06期
3 高世同,吴少廷,林敏,梁驹卿,占国清;弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定[J];中国人兽共患病杂志;2000年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴丛梅,黄天华,吴德生,谢庆东,徐小虎;pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
2 熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
3 张学民,王金生;碱裂解法提取质粒DNA方法的改进[J];安徽大学学报(自然科学版);2000年04期
4 倪大虎,向太和,张盘娣,吴家道,杨剑波,贾士荣,余增亮;应用低能离子束将抗菌肽ShivaA基因导入恢复系明恢63的研究(简报)[J];安徽农业科学;2000年04期
5 许晓风,郁锋,杨启银,陈育如,彭荣淮,贺海生,王程辉;烟草工业下脚料综合利用研究(I)——抗菌成分的提取与抑菌效果测定[J];安徽农业科学;2003年02期
6 李雁楠;杨启银;陈育如;许晓风;彭荣淮;贺海生;王程辉;;烟草工业下脚料综合利用研究——抗虫成分的提取与抗虫效果测定[J];安徽农业科学;2006年02期
7 李建辉;金则新;李钧敏;;木荷ISSR反应体系的建立与优化[J];安徽农业科学;2006年19期
8 王东生,袁肇凯,黄献平,谢梦洲,卢芳国,殷文学;冠心病痰瘀辨证与外周血单核细胞PDGF-A mRNA表达的关系[J];安徽中医学院学报;2003年02期
9 邓文国,曾瑞萍,蒋玮莹,杜传书;BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究[J];癌症;1999年05期
10 周向东,刘凌志,钱桂生,黄桂君,陈杰;一条新的人肺腺癌耐药相关基因全长cDNA片段的克隆及序列分析[J];癌症;2002年04期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 郭昱嵩;王中铎;刘楚吾;陈志明;刘筠;;勒氏笛鲷(Lutjanus russellii)线粒体DNA全序列的测定与分析[A];中国海洋学会2007年学术年会论文集(下册)[C];2007年
2 樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;子房注射法获得转基因甜瓜植株[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
3 严家彬;李新辉;吴淑勤;杜合军;;鳜鱼病毒核酸特异片段表达及高效价抗体制备[A];可持续水产养殖——资源、环境、质量——2003水产科技论坛论文集[C];2003年
4 赵晓瑜;柳伟强;李晓霞;;蚯蚓抗菌肽40kDa Fetidin基因的原核表达与复性[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
5 张核子;王保捷;丁酶;肖仰哲;巴颖;李剑平;李春梅;刘利民;赖跃;;短串联重复位点FGA扩增片段长度多态性研究[A];第二次全国法医物证学学术交流会论文集[C];1998年
6 王泽生;陈美元;廖剑华;卢政辉;郭仲杰;李洪荣;;一个与双孢蘑菇耐热相关基因的全长cDNA序列[A];首届海峡两岸食(药)用菌学术研讨会论文集[C];2005年
7 张国生;叶俊华;徐黎;杨前勇;舒邓群;付平峰;;杜伯文犬vWF基因的PCR-SSCP分析[A];中国畜牧兽医学会养犬学分会第十二次全国养犬学术研讨会论文集[C];2007年
8 肖艳;肖冰梅;彭菲;;2种方法提取四倍体紫锥菊总DNA的比较研究[A];2007年中华中医药学会第八届中药鉴定学术研讨会、2007年中国中西医结合学会中药专业委员会全国中药学术研讨会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 朱翔;弓形虫GRA6和SAG1基因克隆及其表达产物的应用研究[D];苏州大学;2003年
2 张军科;樱桃(Prunus mahaleb L.)PGIP基因及其启动子克隆[D];西北农林科技大学;2000年
3 姚乌兰;多粘类芽孢杆菌WY110抗菌蛋白的制备及其基因克隆和表达[D];中国农业科学院;2000年
4 吴健;肝移植病人乙型肝炎病毒再感染的临床和基础研究[D];浙江大学;2001年
5 朱海红;胸腺肽α1对淋巴细胞信号转导分子表达影响的研究[D];浙江大学;2001年
6 林洪丽;人TIMP-1基因克隆、体外肾脏细胞基因转导、转基因小鼠建立及其肾脏表型变化[D];军医进修学院;2001年
7 解新明;蒙古冰草(Agropyron mongolicum Keng)的遗传多样性研究[D];内蒙古农业大学;2001年
8 赵燕平;热休克蛋白HSP70在恶性肿瘤组织中的表达及其与热证的关系[D];广州中医药大学;2001年
9 张军宁;内、外照射诱导DNA链断裂与修复在肿瘤治疗中的作用[D];苏州大学;2001年
10 万玲;Periostin基因克隆、蛋白表达纯化、抗体制备及其对牙周膜细胞的生物学作用[D];第四军医大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘成芳;STAg联合IFN-γ和蜂胶鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染保护性免疫应答[D];山西医科大学;2005年
2 彭澍;冠心病与载脂蛋白E基因多态性相关性研究[D];暨南大学;2000年
3 熊绍虎;人骨形态发生蛋白-2在大肠杆菌中的高效表达[D];第一军医大学;2000年
4 鲁峰;Fas介导的病理性瘢痕成纤维细胞死亡信号传递及基因调控的实验研究[D];第一军医大学;2000年
5 马世东;非洲猪瘟的间接ELISA诊断试剂盒的研究[D];新疆农业大学;2000年
6 朱振洪;人内皮抑素在家蚕培养细胞和幼虫中表达的研究[D];浙江大学;2001年
7 赵辉;高胆固醇血症引起听力下降的分子机制研究[D];军医进修学院;2001年
8 王刚;应用抑制消减杂交筛选小鼠肾虚证差异表达基因[D];成都中医药大学;2001年
9 王崑;对内蒙古地区三个绵羊品种和一个杂交后代群体基因组DNA的RAPD分析[D];内蒙古农业大学;2001年
10 徐妙云;植物防御素Rs-AFP(R39)基因在河套蜜瓜中的表达[D];内蒙古农业大学;2001年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 林绮萍,吴少庭,翁亚彪,袁仕善,温见翔,张仁利,高世同,黄达娜,雷明军,潘晖榕,秦莉;弓形虫有效抗原表位的筛选及其对小鼠免疫保护性的研究[J];中国热带医学;2004年05期
2 高世同,吴少廷,林敏,梁驹卿,占国清;弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定[J];中国人兽共患病杂志;2000年02期
3 林绮萍,吴少庭,翁亚彪,张仁利,高世同,黄达娜,袁仕善,雷明军,潘晖榕;弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA4基因的克隆与表达[J];中国人兽共患病杂志;2004年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫GRA4基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达[J];中国病原生物学杂志;2006年06期
2 庄闺生;心房利钠因子在肝病中的意义[J];国外医学.消化系疾病分册;1988年03期
3 林绮萍,吴少庭,翁亚彪,张仁利,高世同,黄达娜,袁仕善,雷明军,潘晖榕;弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA4基因的克隆与表达[J];中国人兽共患病杂志;2004年06期
4 吕俊苞;约翰·希尔顿;;婴儿急死综合征(SIDS)颈动脉体的超微结构[J];中国法医学杂志;1991年02期
5 贾雪梅;弓形虫致密颗粒蛋白的分子生物学研究进展[J];国外医学.寄生虫病分册;2000年03期
6 林绮萍,吴少庭,翁亚彪,高世同,张仁利,黄达娜,袁仕善,雷明军,温见翔,潘晖榕,秦莉;弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究[J];中国寄生虫病防治杂志;2005年03期
7 钟慈声;丁舰;俞彰;凌诒萍;俞永富;;血小板激活时其颗粒钙含量与颗粒数目相伴随减少[J];电子显微学报;1996年Z1期
8 孙淑珠;血小板的超微结构与生物学特性[J];继续医学教育;1987年01期
9 洪明理;对血小板认识的进展[J];生理科学进展;1982年02期
10 苑文英;刘辉;刘秀华;刘嘉琳;;弓形虫表面抗原和致密颗粒蛋白的研究进展[J];中国人兽共患病学报;2007年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫致密颗粒蛋白GRA4基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
2 林绮萍;吴少庭;翁亚彪;雷明军;潘晖榕;袁仕善;温见翔;秦莉;黄达娜;张仁利;高世同;;重组弓形虫GRA4的原核表达与纯化[A];中华医学会热带病与寄生虫学分会机会性感染学术研讨会论文汇编[C];2007年
3 吕俊苞;;婴儿急死综合征(SIDS)颈动脉体的超微结构(摘要)[A];第四次全国法医学术交流会论文集(上卷)[C];1991年
4 吴少庭;高世同;张仁利;黄达娜;袁仕善;林绮萍;翁亚彪;雷明军;潘晖榕;秦莉;温见翔;;弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究[A];中华医学会热带病与寄生虫学分会机会性感染学术研讨会论文汇编[C];2007年
5 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫GRA4基因和SAG2基因的重组BCG疫苗对小鼠免疫效果的比较研究[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
6 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫GRA4基因和SAG2基因的重组BCG疫苗对小鼠免疫效果的比较研究[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
7 袁仕善;吴少庭;张仁利;高世同;黄达娜;余新炳;;弓形虫致密颗粒蛋白GRA8的原核表达分析[A];全国新出现传染病学术研讨会资料汇编[C];2004年
8 劳力民;茅晓红;陆威;胡惟惟;;伴有少汗症的Fabry病1例电镜观察[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
9 袁仕善;吴少庭;黄达娜;张仁利;高世同;余新炳;;弓形虫GRA8真核表达质粒的构建与体外表达[A];全国新出现传染病学术研讨会资料汇编[C];2004年
10 梁昌恒;魏刚;戴大临;;鲶精子的超微结构观察[A];第五次全国电子显微学会议论文摘要集[C];1988年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈睿;弓形虫GRA4重组质粒诱导的小鼠免疫保护作用及快速ELISA诊断弓形虫感染的应用研究[D];浙江大学;2009年
2 刘佳佳;高产黄酮苷和萜内酯银杏细胞系选育及黄酮苷积累调控的研究[D];华南理工大学;1999年
3 高峻;一株好氧海洋磁性细菌YSC-1的分离及其特性研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2004年
4 温志超;氧化型低密度脂蛋白活化血小板机理的初步探讨[D];复旦大学;2012年
5 任世英;海洋聚磷菌Halomonas YSR-3的除磷特性研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2008年
6 吴小南;弓形虫P30-P24联合DNA疫苗的免疫保护作用及安全性评价[D];福建医科大学;2007年
7 邝勇;缺氧早期心肌细胞微管损伤与线粒体损害的关系研究[D];第三军医大学;2007年
8 戚贵生;肾脏Telocyte细胞系的建立及功能研究[D];复旦大学;2012年
9 王艳华;弓形虫代谢分泌抗原和表面蛋白1抗原表位研究[D];中国农业科学院;2011年
10 赵广会;弓形虫蛋白酶的鉴定及免疫学研究[D];山东大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵勇;海洋细菌YSC-1及其高铁还原酶的研究[D];山东大学;2005年
2 任世英;一株海洋聚磷菌YSR-3的分离鉴定及其细胞内致密颗粒的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
3 孙红斌;高氧对人中性粒细胞NADPH氧化酶的影响及胶毒霉素的抑制作用[D];同济大学;2006年
4 耿嘉正;血小板膜受体P2Y12基因功能性单核苷酸多态与冠心病及氯吡格雷药物疗效相关性研究[D];四川大学;2006年
5 丁德;犬新孢子虫吉林株NcSRS2基因片段的原核表达及初步应用[D];延边大学;2008年
6 艾鑫;弓形虫PAPS抗体诊断液及SAG1表达研究[D];西南大学;2006年
7 李首庆;弓形虫SAG1、GRA2单基因疫苗及SAG1-GRA2复合基因疫苗的免疫效果研究[D];山东大学;2007年
8 张伟;可口革囊星虫血细胞的分类和单克隆抗体的制备[D];辽宁师范大学;2007年
9 薛明福;弓形虫复合基因疫苗SAG1-ROP2-GRA2的免疫保护性研究[D];山东大学;2008年
10 武海艳;氧化亚铁硫杆菌中磁小体形成相关基因的研究[D];中南大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026