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《全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集》2006年
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弓形虫表面抗原SAG1真核表达重组质粒的构建与表达

黄达娜  吴少庭  袁仕善  张仁利  高世同  耿艺介  
【摘要】:目的构建真核重组表达质粒pVAC-SAG1,并研究其在vero细胞中的表达情况。方法采用多聚酶链反应技术PCR,从弓形虫RH株基因组DNA中扩增截短型的SAG1基因片段,并定向亚克隆至真核表达载体pVAC,构建真核重组表达质粒pVAC-SAG1,利用脂质体介导的转染技术,将其导入vero细胞,RT-PCR检测mRNA表达情况,Western-blot鉴定表达产物。结果从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出SAG1基因片段,所获克隆的序列正确,并被亚克隆到真核表达载体pVAC,成功构建重组表达质粒pVAC-SAG1;转染SAG1的vero细胞,RT-PCR检测可见一条约780bp的目的条带,表达产物经Western-blot鉴定,其分子量约为26kD,能被弓形虫感染血清所识别。结论构建的真核表达质粒pVAC-SAG1能在vero细胞中表达,为弓形虫疫苗的进一步研究打下基础。

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【共引文献】
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