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Eukaryotic Secrete fusion expression of Rhizopus oryzae glucoamylase and Paenibacillus sp.xylanase

Wang Zhi  Dun Bao-Qing  Lu Ming  
【摘要】:正The glucoamylase gene(amy A) was amplified from Rhizopus oryzae 3.866 total DNA extracts. The result showed that the sequence of amyA was consisted of 2049 bp,and encoded 604 amino acids.The xylanase gene(xynA) was amplified from Paenibacillus sp.H10-3 total DNA extracts.The result showed that the mature peptide sequence of xynA was consisted of 636bp,and encoded 211 amino acids.Then,the mature peptide sequence of amyA gene,sequence of linker and sequence of xyn A gene were spliced by overlap extension PCR(SOE-PCR),which amyA-l-xynA was obtained.The fusion gene was then inserted into a Pichia pastoris expression vector pPIC9 to produce the recombinant expression plasmid p?lC9-amyA-l-xynA.By using electric shocks,we successfully transformed the recombinant pP\C9-amyA-l-xynA into Pichia pastoris GS115,which AX 11 was obtained..The maximum yield of the recombinant glucoamylase and xylanase in AX11 culture medium were 5.8U/mL and 32.3U/mL, respectively.

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