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《广东省植物学会第十九期学术研讨会论文集》2010年
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AhNAC3基因在烟草中的遗传转化研究

张碧玉  刘旭  李玲  
【摘要】:干旱、低温和高盐是严重影响作物生长发育及产量的环境胁迫因子。研究表明NAC(NAM/ATAF/CUC)转录因子可以调控多个逆境诱导基因的表达,在植物的抗旱、抗冷和抗盐胁迫过程中发挥重要作用。本实验室从抗旱花生品种粤油7号中克隆了NAC基因,命名为AhNAC3(GenBank登录号EU755022),通过蛋白序列分析和酵母自激活检测等实验,表明其编码的蛋白具有转录因子特性,属于NAC基因家族成员。AhNAC3表达受干旱、冷和ABA的诱导,其编码的蛋白序列与拟南芥RD26具有高同源性,推测其与响应干旱和ABA信号有关。本实验构建35S::GFP空白对照载体和.35S::AhNAC3::GFP融合表达载体,采用农杆菌介导法转化发育时期的烟草叶片,通过抗性筛选,获得322株35S::GFP抗性植株和356株35S::AhNAC3::GFP抗性植株,转化率分别为67.36%和75.26%;对抗性植株进行PCR分子检测,阳性率分别为100%和93.02%,成功获得9株35S::GFP和40株35S::AhNAC3::GFP的T_0代植株。转基因烟草原生质体亚细胞定位实验的结果证实,AhNAC3-GFP融合蛋白定位于细胞核。野生型烟草叶片在单位时间内失水率近T_0代转基因烟草叶片的1.5倍,表明AhNAC3过表达增加了烟草叶片的持水能力。目前我们正开展对转基因烟草中AhNAC3基因的拷贝数、转录水平、翻译水平、下游相关基因的表达以及抗性生理的研究工作,为深入探讨NAC转录因子在逆境应答过程中的调控机制提供基础。

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