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《广东省环境诱变剂学会、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会2010年学术会议资料汇编》2010年
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脉络丛上皮细胞原代培养方法探讨和改进

杨子  赖关朝  黄建勋  唐小江  
【摘要】:背景脉络丛与毛细血管内皮及其基膜构成血-脑脊液屏障。而这一结构对于中枢神经系统的免疫以及外周环境中分子物质的调节也有非常重要的作用。脉络丛的主要生理功能是分泌并调节脑脊液,而脑脊液是维持中枢神经系统功能稳态的重要生理物质,所以对脉络丛上皮细胞的相关研究就成为中枢神经系统研究的一个关键。但是,由于脉络丛上皮细胞原代培养难度较大,众多学者观点均有所不同,所以在此问题上还没有形成一种简单高效的培养方法。目的对传统的脉络从上皮细胞体外培养方法进行改进,探讨简单高效的脉络丛上皮细胞原代培养方法。方法以SPF级的SD大鼠为实验动物,股动脉放血处死,解剖分离大脑脉络丛组织,经青/链霉素溶液漂洗后,剪成糊状,0.25%胰蛋白酶溶液消化,终止消化后离心分离细胞层,转入含胎牛血清和表皮生长因子(EGF)的DMEM/F12培养液中培养,4-5小时生长后换培养瓶,继续培养,每隔2-3天换培养液,倒置显微镜下观察细胞形态。结果脉络丛原代上皮细胞体外培养生长活跃,2-3天时呈单个形态,继续培养呈片状。与传统方法相比,得到的脉络丛上皮细胞在数量、密度以及纯度方面均有明显提高。结论本方法是一种简单、实用并且高效的脉络丛原代细胞培养方法。

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