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《中国植物病理学会2008年学术年会论文集》2008年
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臭矢菜丛枝病植原体的分子鉴定研究

李永  朴春根  徐启聪  田国忠  汪来发  郭民伟  
【摘要】:本实验采用 DAPI 荧光显微镜、PCR、克隆和测序等技术,对海南臭矢菜丛枝病样进行了检测和病原鉴定。以染病臭矢菜总 DNA 为模板应用三对植原体特异性引物进行 PCR 扩增,获得 PCR 产物为16S rDNA(1430bp)、16S-23S rDNA(358bp)、rp DNA(1294bp)。应用 DNA 回收试剂盒获得了三个 PCR 扩增片段的纯化产物,进行克隆和测序。应用 DNAMAN 和 MEGA 软件,对获得的序列与 NCBI 数据库中植原体序列进行同源性分析和构建系统发育树。结果显示臭矢菜丛枝病植原体与花生丛枝病植原体序列同源性最高,16SrDNA 的序列同源性为99.9%,16S-23S rDNA 高达100%, rp 为99.7%。因而将臭矢菜丛枝病植原体归为花生丛枝组(16SrⅡ);根据16S rDNA 的 RFLP 分析, 将其归为16SrⅡ-A 亚组。

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