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中小花型蝴蝶兰DNA的提取和RAPD反应体系的建立

李娜  黄建昌  廖飞雄  
【摘要】:用改良的CTAB法提取了39个中小花型蝴蝶兰品种的叶片基因组DNA,其中38个DNA样品的OD_(260)/OD_(280)值在1.6-2.0之间,可满足进行RAPD扩增的要求。通过对影响RAPD扩增反应的Taq酶浓度、Primer浓度、DNA模板量、Mg~(2+)与dNTPs互作浓度5个因子逐一进行优化,最终建立了适合中小花型蝴蝶兰的RAPD反应体系:总体积25μL,其中Taq酶0.12μL(2U/μL),Primer0.7μL(10μnol/L),模板DNA1.5μL(20ng/μL),dNTPs0.5μL(10mmol/L)/Mg~(2+)(2.0mmol/L)。

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