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《中国观赏园艺研究进展(2010)》 2010年
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蝴蝶兰SRAP-PCR反应体系的优化

余纽  吕复兵  彭昌操  赵小兰  
【摘要】:采用单因素试验法对蝴蝶兰SRAP-PCR反应体系中的DNA模板浓度、Mg~(2+)浓度、dNTP浓度、引物及Taq酶浓度进行了优化,筛选出各因素的最佳水平,建立了蝴蝶兰SRAP-PCR反应的最佳体系(25μL):DNA模板45ng、Mg~(2+)2.5mmol·L~(-1),dNTPs 0.25mmol·L~(-1),引物各0.32μmol·L~(-1)、1.0UTaq酶。采用优化的扩增体系对代表株系进行了SRAP分子标记分析,发现不同斑点的蝴蝶兰之间DNA扩增谱带明亮清晰且多态性条带丰富,证实该体系稳定可靠,可用于蝴蝶兰自交后代的遗传多样性研究。

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