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《第二届全国果树分子生物学学术研讨会论文集》2009年
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平邑甜茶胚胎发育进程及花期子房抑制性消减文库的构建(摘要)

王颖  周攀  魏鑫  董文轩  
【摘要】:利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和石蜡切片技术对平邑甜茶胚胎发育过程及发育特性进行了细致的观察与研究。结果表明:平邑甜茶胚胎发育可明显地分为有性生殖和无性生殖两个阶段,花前9~5d,孢原细胞、大孢子母细胞、四分体、单核胚囊期;花前5d~开花后1d,二核胚囊、四核胚囊、八核胚囊出现、有性胚囊败育;开花前1d~开花后1~5d,有性胚囊败育、珠心细胞形成无性单核、2核、四核胚囊;开花后5~8d,无性八核胚囊形成期;花后10d左右,原胚形成;平邑甜茶胚胎发育时期与相应花期存在着一定的对应关系,但这种对应关系不能将花期与胚胎发育的每一个具体细化时期都对应起来,不同子房中胚胎的发育时期也有较大的出入,同一子房中胚胎发育时,核分裂也并不是同时进行的;以胚胎学观察为基础,确定了平邑甜茶无融合生殖发生的时期,构建了平邑甜茶花期子房的消减cDNA文库,并对通过差异筛选消减文库所获得的差异基因片段进行了序列和同源性分析,表明所构建的消减文库中的确包含一些与植物无融合生殖相关的一些cDNA克隆,进一步证实了在平邑甜茶开花前后1d发生了有性胚囊败育,而无性胚囊开始发育这一重要现象,这种发育是通过多种途径来实现的,是多基因共同调控植物激素作用的结果,验证了平邑甜茶兼性无融合生殖的特点。本研究为今后克隆平邑甜茶无融合生殖相关基因以及果树基因工程奠定了基础,为丰富苹果属无融合生殖资源并揭示平邑甜茶无融合生殖性状的遗传机理提供了胚胎学和分子生物学方面的参考依据。

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