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《中国园艺学会十字花科蔬菜分会第六届学术研讨会暨新品种展示会论文集》2008年
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转Bt基因青花菜的抗虫性研究

李汉霞  张晓辉  张余洋  王涛涛  叶志彪  
【摘要】:以青花菜绿彗星下胚轴为外植体,通过农杆菌介导的遗传转化方法将苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白基因CryIAc和CryIC分别导入青花菜栽培品种中。结果表明:CryIAc和CryIC基因分别转化青花菜,各获得35株卡那霉素抗性植株。分别以CryIAc和CryIC特异引物对转基因植株进行PCR扩增,结果得出27株CryIAc阳性植株和13株CryIC阳性植株。以目的基因CryIAc和CryIC为探针,进行Southern blot分析,证明多数植株目的基因已经整合到青花菜基因组中。对含有单拷贝目的基因植株自交纯合后通过有性杂交获得带有CryIAc和CryIC双价的转基因青花菜。利用RT-PCR检测Bt基因在转基因植株中的表达情况,发现不同株系间在RNA水平上存在显著的表达差异,部分株系中双价Bt同时得到表达。ELISA检测转基因植株Bt毒蛋白含量为0.12~0.82μg g~(-1)FW。结合室内和田间饲虫试验,证明抗虫效果与Bt毒蛋白表达水平正相关。通过多世代选择,获得高抗菜粉蝶和小菜蛾的纯合转基因青花菜材料。现已获批进行转基因安全的中间试验。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 吴娜拉胡;郎志宏;朱莉;张杰;黄大昉;;抗虫基因研究及在芸薹属作物上的应用[J];生物技术通报;2012年08期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 王鹏;赵强;刘蕾;;植物源抗虫基因在作物育种中的应用[J];山东农业科学;2007年02期
3 吴振映;柳絮;王文英;姚方印;刘开启;;利用农杆菌介导法获得转cry2A抗虫基因水稻的研究[J];山东农业科学;2011年05期
4 熊万光,张灿,时西民,吴夫安,吴敬音,曹凤喜,朱彬,张维敏;转API基因育成高强力品系W-S0367研究[J];安徽农学通报;2004年01期
5 张灿,时西民,吴夫安,曹凤喜,刘渠德,熊万光,周德安,张维敏;病虫双抗杂交棉新组合F_1代试验[J];安徽农学通报;2004年01期
6 李光远;王宜娜;王凤华;;不同激素对结球甘蓝下胚轴离体培养的影响[J];安徽农学通报;2007年15期
7 王云川;沈厚芬;胡向阳;徐福海;;抗虫棉的抗性及综合防治技术[J];安徽农学通报;2008年18期
8 郑雪琴;;Cre/loxp重组系统在转基因植物中删除标记基因的应用[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年01期
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10 张征田;梁子安;王明伟;杜瑞卿;;3种不同类型棉田害虫与天敌时空动态变化[J];安徽农业科学;2007年22期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 高国训;顾自豪;靳力争;陆子梅;;蔬菜抗虫种质资源的收集与鉴定[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
2 雷建军;;抗虫基因工程及其在蔬菜育种上的应用[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
3 雷建军;陈国菊;曹必好;曾国平;;蔬菜基因工程研究进展[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
4 张睿;陈晓丽;田琳琳;赵梁军;;伞形槐转雪花莲凝集素基因遗传转化体系的建立[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
5 雷建军;陈国菊;曹必好;;十字花科蔬菜基因工程研究进展[A];中国园艺学会十字花科蔬菜分会第六届学术研讨会暨新品种展示会论文集[C];2008年
6 崔磊;杨丽梅;方智远;刘玉梅;庄木;张扬勇;孙培田;;农杆菌介导的Bt基因crylAh转化结球甘蓝的研究[A];中国园艺学会十字花科蔬菜分会第六届学术研讨会暨新品种展示会论文集[C];2008年
7 张雨丽;张桂征;韦博尤;闭立辉;顾家栋;;转基因育种技术及其在家蚕育种中的展望[A];中南五省区蚕桑育种协作研讨会论文集[C];2009年
8 王少华;华金平;易先达;翟忠琴;陈道甫;张成;;国内棉花抗虫育种进展与方向[A];实施科技兴农战略促进农村经济发展学术交流论文集[C];2004年
9 黄骏麒;林栖凤;李冠一;;第三章 植物分子育种的研究与应用[A];植物分子育种——第四届全国植物分子育种学术研讨会论文集[C];2004年
10 倪建福;欧巧明;令利军;叶春雷;武禄光;崔文娟;;外源DNA导入小麦选育新品种的研究[A];第五次全国植物分子育种代表大会暨学术交流会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈洋;转cry1Ab/vip3H水稻抗螟性的鉴定及三类不同转基因水稻对其非靶标生物褐飞虱影响的评价[D];浙江大学;2010年
2 刘宏波;甘蓝型油菜抗病虫基因遗传转化及转基因植株抗性鉴定的研究[D];浙江大学;2010年
3 王丽丽;大白菜核基因雄性不育系定向转育及分子标记辅助育种研究[D];沈阳农业大学;2010年
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5 苏长青;适合转基因抗虫水稻和棉花PCR检测标准质粒的构建及试用[D];中国农业科学院;2011年
6 耿丽丽;转Bt cry8Ea1、cry8Ha1基因花生的研究[D];中国农业科学院;2011年
7 许明;籽粒苋AmA1基因和人乳铁蛋白基因转化水稻的研究[D];福建农林大学;2011年
8 曾芳琴;油菜S45AB隐性核不育分子机理与应用研究[D];华中农业大学;2010年
9 杨宙;双价Bt抗虫水稻的培育和转基因水稻回交效应分析[D];华中农业大学;2011年
10 杨亚军;棉铃虫Cry1Ac抗性相关钙粘蛋白基因突变的鉴定与检测[D];南京农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 付雪林;转Bt基因甘蓝的抗虫性研究[D];华中农业大学;2010年
2 刘鑫;利用分子标记辅助选择培育和评价三种BT基因(CRY1AC、CRY1C~*和CRY2A~*)抗虫水稻[D];华中农业大学;2010年
3 吴寿明;转基因抗虫棉单交种、三交种的优势分析[D];华中农业大学;2010年
4 王继磊;两种Bt基因(cry1C~*和cry2A~*)抗虫花卉的培育[D];昆明理工大学;2010年
5 张海娟;芜菁胚发育相关基因BcNAC2的功能分析[D];浙江大学;2011年
6 张燕飞;Bt水稻外源基因及其表达蛋白的环境持留研究[D];浙江大学;2011年
7 赵霏;利用近等基因系研究Pea-Fer基因对转基因水稻重要生物学特性及品质性状的影响[D];浙江大学;2011年
8 林智敏;杀虫基因cry1Ca的人工合成、原核表达及其转基因水稻的培育[D];福建师范大学;2010年
9 谭茂玲;甘蓝型油菜转基因体系的建立与PWY86及TLW10表达载体的遗传转化[D];西南大学;2011年
10 贾荣荣;蔗糖磷酸合成酶SPS的克隆及对棉花的遗传转化研究[D];陕西师范大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 唐克轩,徐亚男,李旭峰,孙小芬;表达雪花莲外源凝集素基因的油菜转基因植株的获得(英文)[J];复旦学报(自然科学版);2001年06期
2 罗晨;王素琴;张帆;刘凡;张芝利;;转基因抗虫白菜对菜青虫、小菜蛾抗性的研究[J];华北农学报;2005年04期
3 佘建明,蔡小宁,朱祯,朱卫民,张初贤,袁希汉;普通不结球白菜抗虫转基因植株的获得[J];江苏农业学报;2000年02期
4 张永侠;郎志宏;朱莉;杨丽梅;张杰;苍晶;黄大昉;;农杆菌介导的Btcry1Ⅰa基因转化花椰菜的研究[J];中国农业科技导报;2011年01期
5 窦黎明;韩岚岚;张杰;何康来;赵奎军;黄大昉;宋福平;;苏云金芽胞杆菌cry1Ia基因的克隆、表达与活性研究[J];农业生物技术学报;2007年06期
6 周永刚,田颖川,莽克强;苋菜凝集素基因的克隆及在转基因烟草中抗蚜性研究[J];生物工程学报;2001年01期
7 Clive James;;2011年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势[J];中国生物工程杂志;2012年01期
8 林良斌,官春云,周小云,何业华,杨志新;转基因抗虫油菜中Bt杀虫蛋白基因稳定遗传和高效表达及抗虫性研究[J];作物学报;2002年02期
9 杨广东,朱祯,李燕娥,朱祝军,肖桂芳,魏晓丽;大白菜转修饰豇豆胰蛋白酶抑制剂基因获得抗虫植株[J];园艺学报;2002年03期
10 杨广东,朱祯,李燕娥,朱祝军,上官晓霞,吴霞;雪花莲外源凝集素基因在大白菜中的表达和抗蚜性遗传分析[J];园艺学报;2003年03期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李树贤,陈远英;结球甘兰下胚轴组织培养形态发生的组织学研究[J];西北植物学报;1993年04期
2 李树贤,陈远英;结球甘蓝离体下胚轴愈伤组织的维管组织及管状分子[J];西北植物学报;1994年01期
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4 卫志明,黄健秋,徐淑平,薛红卫,钟仲贤,顾桢祥,徐悌惟,李贤;甘蓝下胚轴的高效再生和农杆菌介导B.t.基因转化甘蓝[J];上海农业学报;1998年02期
5 李贤,姚泉洪,庄静,陈海英,范惠琴,彭日荷,熊爱生;ACC解氨酶基因转入青花菜的研究[J];上海农业学报;2001年03期
6 何玉科;;甘蓝Ri T-DNA转化根的植株再生[J];生物工程学报;1990年02期
7 赵荣敏,范云六,石西平,王京红,纵微星;获得高抗虫转双基因烟草[J];生物工程学报;1995年01期
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10 蓝海燕,陈正华;农杆菌介导的芸薹属植物遗传转化技术的研究进展[J];生物技术通报;1999年03期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 夏兰芹;Bt杀虫基因在转基因抗虫棉中的表达与遗传稳定性的研究[D];中国农业科学院;2000年
2 崔洪志;vgbM基因在植物中的表达及抗虫棉GK12中外源基因整合的初步分析[D];中国农业科学院;2004年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 尹学伟;李向永;张龙;陈斌;;苹果品种对苹果绵蚜的抗性测定[J];云南农业大学学报;2010年01期
2 张中润;梁李宏;黄伟坚;王金辉;;5个不同腰果品系对腰果细蛾抗虫性研究[J];植物保护;2008年05期
3 ;抗病性抗虫性特强的两性花山葡萄新品种──双红[J];柑桔与亚热带果树信息;2000年04期
4 王海平;李锡香;沈镝;邱杨;宋江萍;;大蒜种质资源对蒜蛆的抗性评价[J];植物遗传资源学报;2010年05期
5 程家胜,李文谷,孟秀美,田颖川,莽克强;转基因苹果试管苗的抗虫性检测[J];中国果树;1998年04期
6 黄红青;;锥栗对栗瘿蜂抗性与营养元素关系研究[J];福建林业科技;2005年04期
7 孙志宏;邓振山;李延清;;雪花莲凝集素在转基因蔬菜中的抗虫性[J];安徽农业科学;2006年06期
8 李汉霞;尹若贺;陆芽春;张俊红;;CryIA(c)转基因结球甘蓝的抗虫性研究[J];农业生物技术学报;2006年04期
9 韩金星;洪日新;黄金艳;覃斯华;周林;李文信;;野生西瓜对瓜绢螟的抗性试验初报[J];西南农业学报;2009年03期
10 张中润;梁李宏;黄伟坚;王金辉;黄海杰;;5个不同腰果品系对茶角盲蝽的抗虫性[J];热带作物学报;2010年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李汉霞;张晓辉;张余洋;王涛涛;叶志彪;;转Bt基因青花菜的抗虫性研究[A];中国园艺学会十字花科蔬菜分会第六届学术研讨会暨新品种展示会论文集[C];2008年
2 江志伟;尹新明;;转Bt基因小黄菊对菊天牛抗性初步研究[A];河南省植保学会第八次、河南省昆虫学会第七次、河南省植病学会第二次会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
3 杨广东;朱祯;朱祝军;李燕娥;;转基因大白菜外源基因的遗传和表达初步研究[A];中国园艺学会第九届学术年会论文集[C];2001年
4 高国训;顾自豪;靳力争;陆子梅;;蔬菜抗虫种质资源的收集与鉴定[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
5 刘凡;徐恒戬;赵泓;罗晨;;转pinⅡ基因白菜的遗传分析及小菜蛾抗性鉴定[A];中国园艺学会第六届青年学术讨论会论文集[C];2004年
6 刘凡;徐恒戬;赵泓;罗晨;;转pinⅡ基因白菜的遗传分析及小菜蛾抗性鉴定[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
7 胡昊;熊威;毛静;王彩云;;蚜虫高感大菊品种叶片离体再生体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
8 张中润;梁李宏;黄伟坚;王金辉;黄海杰;;5个不同腰果品系对腰果茶角盲蝽的抗性研究[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年
9 张中润;梁李宏;黄伟坚;梅新;王金辉;;氮、磷、钾肥配施对腰果红带蓟马发生为害的影响[A];植物保护与现代农业——中国植物保护学会2007年学术年会论文集[C];2007年
10 李雅菲;邢梅;张蝶;李杰;王彩云;;几种菊属植物叶表毛状体形态观察的比较[A];中国观赏园艺研究进展 2009[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘彦清 整理;“欣杂1号”营养钵育苗移栽产量高[N];河北科技报;2006年
2 刘海新;孙长德与枣树的不解情[N];中国特产报;2005年
3 江苏省农科院食用菌中心 宋金娣;白色鸡腿菇[N];江苏农业科技报;2002年
4 百绿中国公司 齐晓;运动场草坪草特性浅析[N];中国花卉报;2008年
5 汪仁银 汪送宝;极早熟扁豆——望扁一号[N];山西科技报;2001年
6 何伯伟;蛇瓜[N];山西科技报;2002年
7 西北农林科技大学园艺学院 符轩畅;优质早熟苹果新品种——红盖露[N];河北科技报;2009年
8 明明;果类珍品——金珠果[N];中国特产报;2003年
9 李宾;抗热春豇豆的栽培要点[N];农民日报;2003年
10 晓红;“红心”白菜“早阳红”培育成功[N];农民日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 眭顺照;蜡梅开花过程基因表达的ESTs分析与凝集素基因功能的初步鉴定[D];西南大学;2006年
2 杨广东;基因工程改良几种重要蔬菜的抗虫性[D];浙江大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 尹若贺;Bt转基因结球甘蓝的遗传分析和检测[D];华中农业大学;2004年
2 王树昌;76个芒果品种/种质对三种嫩梢害虫抗性评价[D];华南热带农业大学;2004年
3 林敬晶;蜡梅凝集素基因Cplectin在百合中的表达及抗虫性初步鉴定[D];西南大学;2008年
4 李琳莉;蜡梅(Chimonanthus praecox (L.)Link)凝集素基因Cplectin的抗虫功能分析[D];西南大学;2008年
5 崔磊;Bt cry1Ia8抗虫基因对结球甘蓝的转化及其表达[D];中国农业科学院;2009年
6 杨俊杰;农杆菌介导的双价抗虫基因Pta-CrylAc番茄的遗传转化研究[D];吉林农业大学;2006年
7 付雪林;转Bt基因甘蓝的抗虫性研究[D];华中农业大学;2010年
8 何俊平;切花菊蚜虫抗性鉴定与机理探讨及LLA转基因研究[D];南京农业大学;2010年
9 潘敏;不同品种韭菜对迟眼蕈蚊抗性的聚类及相关性分析[D];山东农业大学;2005年
10 张跃;苦瓜对黄足黑守瓜的抗虫性及抗虫性物质的初步研究[D];广西大学;2008年
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