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椪柑愈伤组织的遗传转化及转化体的再生

郑启发  胡桂兵  陈大成  黄自然  林顺权  
【摘要】:在研究促进椪柑愈伤组织的增殖、体细胞胚发生和植株再生条件的同时,通过农杆菌感染金剐砂涡旋创伤的椪柑愈伤组织,将API和AP—BD基因转入椪柑细胞并经过选择再生培养获得了转化植株。采用含不同目的基因(AP—DB和API)的同一菌株LBA4404的混合菌液感染基因受体材料椪柑的愈伤组织。通过金刚砂创伤处理比未创伤处理的均获得了较多的KanR胚状体;金刚砂创伤对椪柑转化效果的影响达到了显著差异的水平。经过PCR检测的138个转化体样品中,含有AP—D基因、AP—B基因和API基因的样品,分别占6.5%、 7.2%和8.7%;同时含有AP—D、AP—B和API基因的仅有1个样品,占0.7%;同时含有 AP—D和AP I基因的有4个样品,占2.9%;同时含有AP—B和AP I基因的有2个样品, 占1.4%;同时含有AP—D、AP—B基因的只有1个样品,占0.7%。Southern blot的检测结果显示基因在植物中是以单拷贝的形式整合。

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