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《第十五届中国体视学与图像分析学术会议论文集》2017年
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长时间无血清培养条件下的脂肪间充质干细胞恢复血清培养后的生长与分化状况研究

杜珍武  王庆宇  杨麒巍  任明  陈高扬  赵海月  张桂珍  
【摘要】:目的:探讨脂肪间充质干细胞置于无血清培养30天后,重新给予血清培养后的细胞生长与分化能力的变化,阐述脂肪间充质干细胞耐受不良生长环境的能力。方法:脂肪间充质干细胞分别置于血清培养基与无血清培养基,无血清培养30天后的脂肪间充质干细胞重新恢复血清培养。应用倒置显微镜观察生长细胞形态,应用CCK-8检测细胞活性,因此判定细胞生长情况,BrdU掺入法检测细胞增殖的能力,成脂与成骨分化诱导后分别应用油红o染色与茜素红染色评估细胞成骨与成脂的情况。结果:在无血清培养的条件下,脂肪间充质干细胞的形态逐渐由成纤维样变成圆形,细胞收缩生长,与血清培养的细胞CCK-8检测细胞活性OD值随时间成递增趋势相比无血清培养细胞的OD值随时间无明显变化,说明细胞在无血清条件下生长受到抑制,与血清培养的细胞相比,无血清培养24小时的细胞的BrdU掺入能力明显下降;无血清培养30天后的脂肪间充质干细胞重新恢复血清培养24h后细胞形态学由圆性变成成纤维样,随着细胞培养时间延长CCK-8检测细胞活性的OD值随成递增趋势,BrdU掺入能力明显增加,与正常血清培养的细胞相比,这部分细胞的成脂分化后,观察到明显的油红O染色,成骨分化后,未见明显的茜素红染色。结论:无血清培养下的脂肪间充质干细胞的生长与增殖受到抑制,长时间无血清培养后重新恢复血清培养其生长增殖能力恢复,但成骨分化能力受到损害。

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