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《四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会论文集》2011年
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基于三重引物的PCR技术鉴定四川雉鹑等雉科鸟类的性别

薛飞  李莉  李文庆  李校  邹方东  李静  
【摘要】:四川雉鹑Tetraophasis szechenyii,又名黄喉雉鹑,是鸡形目雉科雉鹑属的鸟类,为中国的特有物种,国家一级保护动物,被IUCN红色名录列为Least Concern。四川雉鹑是单态性鸟类,难以简单地从外表分辨出其性别,对其性别鉴定的研究将有利于深入研究其种群性比、预测种群发展趋势、制定保护措施以及人工繁育等。本研究通过生物信息学方法筛选了原鸡Gallus gallus性染色体上的EST CV854162基因为目标基因,采用三重引物的设计方法,在W和Z染色体上的同源保守区域设计共同的上游引物F,在其下游的非同源区域分别设计下游引物R-W和R-Z。通过该引物对10个已知性别的四川雉鹑样本进行PCR扩增,结果显示在所有的雄性个体上扩增出了一个107 bp的条带,而在所有的雌性个体同时扩增出107 bp和304 bp两条带,PCR鉴定结果与形态学和生态学的观察结果一致,表明该方法能成功、准确地对四川雉鹑的性别进行鉴定。测序显示与原鸡的同源序列相比,四川雉鹑的W染色体在EST CV854162基因中插入了一段AT富集的重复序列102 bp。对其他10种雉科鸟类的检测结果显示,能在雄性个体上扩增出一个107 bp条带,而雌性个体扩增出107 bp和202 bp两条带。本研究表明基于EST CV854162基因内的三重引物PCR方法能够简便、快捷且准确地鉴定出四川雉鹑和部分珍稀濒危雉科鸟类的性别,因其扩增的目标片段小,能够应用于非损伤性样本,因此在今后雉科鸟类的性别鉴定方面将具有广泛的应用前景。

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