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实时荧光定量PCR法检测对虾白斑综合征病毒

陈信忠  任聪  龚艳清  王寿昆  
【摘要】:对虾白斑病由白斑综合征病毒(WSSV)感染引起,所有养殖对虾对该病高度易感,蟹类、小龙虾、淡水虾以及各种龙虾也易感,但发病率和死亡率有很大差别。多种虾类常表现为持续感染或终身隐性感染。盐度剧烈变化等环境胁迫可能诱发该病爆发流行。隐性感染虾体内的病毒含量极低,现有方法难以检测。建立一种快速、灵敏、准确的检测方法对预防该传染病的发生和流行具有重要的意义。本文应用TaqMan探针技术设计了探针和引物,建立了检测WSSV的实时荧光定量PCR方法。对影响PCR反应的主要因素Mg2+浓度和退火温度等进行了优化,证明当Mg2+浓度为3.5~4.0mmol,退火温度为59~60℃时可获得最佳的扩增和检测效果。

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