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Bt基因转入烟草叶绿体获得转化植株的研究

丁玉梅  杨正安  周晓罡  张绍松  孙茂林  
【摘要】:构建了苏云金杆菌晶体毒蛋白基因 Cry1A6的烟草叶绿体表达载体 pCTBt,该载体以烟草叶绿体基因组 trnI-trnA 为同源重组片段,含有壮观霉素抗性筛选标记基因 aadA、质体特异性启动子 Prrn 和终止子 TpsbA.利用基因枪转化法,将 pCTBt 导入栽培烟草红花大金元叶绿体,经过4次继代筛选,获得9个抗壮观霉素的转化株系,转化频率为0.3~0.6株/枪,其中有5个株系 PCR 检测结果为阳性,初步确定 Cry1A6基因已整合到烟草叶绿体中.转基因烟草抗斜纹夜蛾试验表明,幼虫死亡率为10%~75%.转基因烟草植株具有较好的杀虫活性.

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